西洋参制剂抗疲劳作用的实验研究

【摘要】[目的]通过小鼠动物试验验证西洋参制剂的抗疲劳作用。[方法]采用“保健食品功能学评价程序和检验方法”中抗疲劳实验规定的方法，以小鼠为实验对象，研究西洋参制剂对小鼠体重、游泳时间、爬杆时间及血清尿素氮、血乳酸、肝糖原等生化指标的影响。[结果]西洋参制剂能明显延长小鼠负重游泳时间、延长小鼠爬杆时间;能明显降低小鼠运动后的血清尿素氮和血乳酸的含量;且差异均有显著性。[结论]西洋参制剂具有抗疲劳作用。

【关键词】抗疲劳;西洋参;实验研究

西洋参为五加科植物西洋参PanaxquinqueoliumL.的干燥根，是名贵的益气养阴药之一。具有补气养阴、清肺肾、凉心脾、清虚火、生津止渴、补阴退热、调补五脏、安神除烦、固精等功效[1]。现代研究表明，西洋参皂苷具有明显的抗疲劳作用[2?3]。本实验以小鼠为实验研究对象，采用“保健食品功能学评价程序和检验方法”中抗疲劳实验规定的方法[4]，进一步验证西洋参制剂的抗疲劳作用，旨在开发一种功效显著、专门针对易疲劳人群的抗疲劳制剂。

1材料与方法

1.1实验样品及制备方法

西洋参制剂由杭州娃哈哈集团有限公司研发中心研制。其制备方法为：西洋参原药材切片后加10倍量40%食用乙醇浸泡(25℃～30℃)1小时，加热回流1.5小时，收集提取液;药渣加入6倍量40%食用乙继续加热回流提取1小时，收集提取液，合并提取液，回收乙醇，真空浓缩至比重1.03，高速离心(16000转/分钟)直至澄清药液，真空法定浓缩到比重1.05，喷雾干燥得淡黄色粉末。该制剂的主要质量指标：总皂苷≥24%，总多糖≥15%，总蛋白≥10%，农残总量≤10PPb。试验时用蒸馏水配制成不同浓度的样品液，供试。

1.2实验动物和检测条件

实验用清洁级雄性BALB/C小白鼠，体重19g—22g，由中国科学院上海实验动物中心提供。动物饲料由浙江省实验动物中心提供。检测环境条件，温度范围20℃～25℃，相对湿度范围40%～70%。小鼠试验前在动物房环境中适应5天。

1.3主要仪器与试剂

游泳箱(50cm×50cm×40cm)、电子天平、铅皮、爬杆架(1.0cm×25cm)、ACE全自动生化分析仪、721分光光度计、离心机、匀浆器、振荡器、恒温水浴箱、电热水箱、手术器械、灌胃器械等。三氯醋酸、葡萄糖标准液、蒽酮、氟化钠、钨酸钠、对羟基联苯、乳酸钙、硫酸铜等。

1.4实验方法

1.4.1实验分组及周期

每个试验项目均设立不同剂量的实验组和阴性对照组，其中实验组根据给药剂量不同分为低剂量组(0.025g/kg体重)、中剂量组(0.050g/kg体重)、高剂量组(0.150g/kg体重)。所有实验组经口(灌胃)给予不同剂量的样品，灌胃容积为0.1ml/10g体重，每天一次，计30天;阴性对照组给予同等容积的蒸馏水。

1.4.2负重游泳试验

取BALB/C雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只。按剂量设计连续给样品30天，于末次灌胃后30分钟，将小鼠放入水中游泳，水深30cm，水温25℃±0.5℃，鼠尾根部负荷5%体重的铅块，记录小鼠自游泳开始生死亡的时间。

1.4.3爬杆试验

取BALB/C雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只。按剂量设计连续给样品30天。将爬杆架置于水温15℃、水深10cm的水盆中，于末次灌胃后30分钟，将小鼠放在长25cm，直径1cm的有机玻璃棒上，使小鼠肌肉处于静力紧张状态，第三次落水时终止实验，累计记录三次小鼠因肌肉疲劳而从玻璃圆棒上跌落下来的时间。

1.4.4血清尿素氮测定

取BALB/C雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只。按剂量设计连续给样品30天。于末次给予样品后30分钟，将小鼠放入30℃水中游泳90分钟，取出。立即摘眼球采血，离心取血清，用ACE全自动生化分析仪测小鼠血清尿素氮。

1.4.5肝糖原测定

处理同1.4.4，立即处死。精确称取肝脏200mg，经匀浆，离心后测定肝糖原。

1.4.6血乳酸测定

处理同1.4.4，小鼠末次给予样品30分钟后，负重2%体重，温度30℃水中游泳45分钟。安静15分钟后采血测定血乳酸。

1.5实验数据统计采用方差分析处理数据。

2结果

2.1对小鼠体重的影响

结果见表1。表1对小鼠体重的影响(略)

由表1可见，经口给予不同剂量的样品30天，各剂量组小鼠在实验初期、中期和末期体重和阴性对照组比较差异均无显著性(F检验，P>0.05)。

2.2对小鼠负重游泳时间及爬杆时间的影响

结果见表2。表2对小鼠负重游泳时间的影响(略)

由表2可见，经口给予不同剂量的样品30天，与阴性对照组相比，三剂量组小鼠能明显延长负重游泳时间及爬杆时间，差异均有显著性(q检验，P<0.05)。

2.3对小鼠运动时血清尿素氮及运动后血乳酸的影响

结果见表3。表3对小鼠运动时血清尿素氮及运动后血乳酸的影响(略)

由表3可见，经口给予不同剂量的样品30天，与阴性对照相比，中剂量组、高剂量组血清尿素氮含量明显降低，三剂量组血乳酸含量明显降低，差异均有显著性(q检验：P<0.05)。

2.4对小鼠运动时肝糖原消耗量的影响

结果见表4。表4对小鼠运动时肝糖原含量的影响(略)

由表4可见，经口给予不同剂量的样品30天，三剂量组肝糖原含量与阴性对照组相比较差异均无显著性(F检验，P>0.05)。

3讨论

疲劳(Fatigue)是机体复杂的生理生化变化过程，是机体生理过程不能将其机能持续在一特定水平或器官不能维持其预定的运动强度。由于运动引起机体生理生化改变而导致机体运动能力暂时降低的现象，称为运动性疲劳[5]。

运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最直接的表现，游泳时间和爬杆时间的长短可以反应动物运动疲劳的程度。运动过程中随着运动的进行血清尿素氮会升高，血清尿素氮的含量可以反映体内肌肉蛋白质的分解和合成代谢状况，肌肉细胞大强度训练后的损伤及恢复状况，所以血清尿素氮是评价机体在运动情况下体力负荷承受能力的重要灵敏指标。在运动过程中血乳酸含量随着机体运动的进行而升高，血乳酸的含量说明了在无氧条件下体内糖酵解即能量的消耗的程度，血乳酸的积累会引起机体疲劳可反映机体疲劳程度，所以血乳酸含量是评价抗疲劳的常用生化指标。根据“保健食品功能学评价程序和检验方法”中抗疲劳实验结果判定规则：“若1项以上(含1项)运动试验(负重游泳实验或爬杆试验)和2项以上(含2项)生化指标(血乳酸、血清尿素氮、肝糖元/肌糖元)结果阳性，即可判定该受试样品具有抗疲劳的作用[6]。”

本研究结果表明：西洋参制剂能明显延长小鼠负重游泳时间、延长小鼠爬杆时间;能明显降低小鼠运动后的血清尿素氮和血乳酸的含量，差异均有显著性(P<0.05)，且该制剂对小鼠正常体重无影响(P>0.05);说明西洋参制剂具有抗疲劳作用。