水杨梅根提取物的GC—MS分离鉴定

【摘要】[目的]研究水杨梅根提取物不同提取部位的主要成分。[方法]采用系统溶剂法，对水杨梅根水提液进行氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取，对各提取液进行气相色谱?质谱联用法分析其化学成分。[结果]水杨梅根提取物中含有较多的苯基及含氧基等活性基团成分。[结论]水杨梅根成分为进一步药用研究提供了依据。

【关键词】GC—MS;水杨梅根;提取物

华南理工大学自然科学基金资助项目(322?E5041170)，学生研究计划SRP项目(B10?Y13014)水杨梅根为茜草科落叶灌木植物水杨梅Adinarubella(Sieb.etZucc.)Hance的根，具有清热解毒，散淤止痛之功效。临床证明水杨梅根具有良好的抗肿瘤活性，尤其是对消化道肿瘤如胃癌、胰腺癌、肠癌等[1?2]效果显著。水杨梅的花果序中含儿茶素类化合物，另有熊果酸、齐墩果酸、β?谷甾醇、水杨梅甲素及生物碱等，但水杨梅根的有效成分报道较少，只有何直升等[3]曾报道了自水杨梅根中分离的数种新的Quinovicacid糖苷化合物。但水杨梅根含有多种成分，对其不同提取部分的比较分析，有助于发现其特征性成分，为针对性的提取分离提供帮助。本文对水杨梅根的煎煮液经系统溶剂提取，采用气—质联用方法分析了其中的主要成分，为有效成分的分离研究提供基础。

1实验材料与方法

1.1仪器：GCMS?QP2010气相色谱-质谱联用仪，日本SHIMADZU公司生产。质谱质量范围m/z:2?1024，S/N>60，精度：PFTBA的各峰(m/z69/131/219/264/414/502/614/)在±0.1质量数以内。毛细管柱：(30.0m×0.25mm)，载气：甲烷氦气，有机相针式过滤器(13mm×0.22μm)。

1.2色谱条件

柱温40.0℃，进样温度270.0℃，进样量1μL，分离度10，总流速16.4mL/min，初始温度设定40.0℃，保留2min，以10.0℃/min升温到250.0℃，保留3.00min，再以10.0℃/min升温到270.0℃，流速1.22mL/min，扫描时间3.00min～31.00min，扫描频率2次/s，线性速率39.8cm/sec。扫描范围：30.00m/z～800.00m/z。

1.3质谱条件

离子源温度200.0℃;分离面温度250.0℃;溶解断裂时间2.9min,极小扫描宽度0,极限100。

1.4试验方法

水杨梅根1kg，加入蒸馏水5000mL，90℃水温煎煮2h，保留滤液，滤渣加入3000mL蒸馏水，90℃水温再煎煮2h，过滤后合并滤液。减压浓缩至1500mL。先后用1000mL氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取2次，分别吸取1mL萃取液，用相同溶剂定容50mL。充分混合。用有机相针式过滤器过滤，进样分析。

2结果

2.1GC?MS总体分析

分离色谱图见图1。大部分组分色谱峰形较好，能够采用数据分析软件直接进行NIST库搜索，并进行峰面积相对百分含量计算。成分名称及相对含量见表1。表1水杨梅根不同溶剂提取物中主要成分及相对含量(略)

2.2氯仿提取物

水杨梅根水提物经氯仿萃取后，极性较小的成分均被提取，其中主要成分为三十六碳甾体、林丹类化合物，另含有少量吡啶类生物碱。如图1中A所示。

2.2乙酸乙酯提取物

乙酸乙酯萃取物中含有较多的小分子化合物。GC?MS显示较多的含苯基团，如甲苯基、乙苯基。除了溶剂峰外，另有突出的2峰为环已酮和丁醇，2?丁氧基。如图1中B所示。

2.3正丁醇提取物

正丁醇萃取物色泽为红棕色，GC?MS显示多数为庚酮类及丁酸酯类化合物。如图1中C所示。

3讨论

水杨梅根具有很多药理作用，其抗肿瘤效果显著，故在传统中医中多有运用，但是现代药物研究还未对其进行有效成分的鉴定及分离，本试验通过GC-MS联用对水杨梅根不同溶剂提取液进行分析，发现许多含苯基及含氧基化合物，这些活性基团易氧化，是水杨梅根药理作用的基础。这些成分多存在于乙酸乙酯萃取相中，故推断水杨梅根主要成分是可用乙酸乙酯萃取的酚性成分。为了证实该推断，需要对不同提取部位的抗肿瘤活性进行研究，并对有效成分作进一步分离，以期找到主要的抗肿瘤活性成分。