测定九味肝泰胶囊中黄芩苷含量

【摘要】[目的]建立九味肝泰胶囊中黄芩苷的含量测定方法。[方法]色谱柱为大连依利特C18(200×4.6mm，5μm);流动相：甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1);检测波长274nm;柱温35℃;流量1min/ml。[结果]黄芩苷在10.6～106.0μg/ml浓度范围内线性关系良好，r=0.9997，平均回收率为97.00%，RSD=1.68%。[结论]本法方便、快速、准确，可用于九味肝泰胶囊的质量控制。

【关键词】高效液相色谱法、九味肝泰胶囊、黄芩苷、含量测定

九味肝泰胶囊是由三七、郁金、黄芩、山药、五味子等9味中药材组成，具有化瘀通络、疏肝健脾的功效，用于气滞血瘀兼肝郁脾虚所致的胁肋痛或刺痛，抑郁烦闷，食欲不振，食后腹胀脘痞，大便不调，或胁下痞块等。黄芩有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎作用[1]。本文建立了九味肝泰胶囊中黄芩苷的含量测定方法，该方法具有分离效果好、灵敏、准确等优点，可用于该产品的质量控制。

1仪器与试药

高效液相色谱仪：Agilent1100型，色谱柱：大连依利特C18(200×4.6mm，5μm);黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110715-200514);甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为超纯水;九味肝泰胶囊(长沙泰宝才松堂制药厂，批号为20080107，20080201，20080206)。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱为大连依利特C18(200×4.6mm，5μm);流动相：甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1);检测波长274nm;柱温35℃;进样量10μL;流量1min/mL。此条件下黄芩苷与其它组分能达到基线分离，且阴性对照试验无干扰(图1)。

2.2供试品溶液的制备取供试品研细混匀，取约6g，精密称定，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理20min，取出，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过即得。

2.3线性关系的考察精密称取黄芩苷对照品10.60mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀;分别精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，黄芩苷的浓度为横坐标绘制标准曲线，计算得回归方程：Y=1.318×106x?1.753×104，r=0.9997，表明黄芩苷的浓度在10.6～106.0μg/mL范围内具有良好线性关系。

2.4精密度试验取同一对照品溶液10μL，平行操作6次，注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积计算。结果峰面积的RSD=0.71%，表明仪器精密度良好。

2.5重现性试验取同一批号的九味肝泰胶囊(批号：20080107)，按含量测定项下供试品制备方法平行操作5次，并测定。结果RSD=1.24%，表明方法重现性良好。

2.6稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，按上述色谱条件分别在0、4、8、16、24、48h分别进样6次，测定峰面积，结果48h内其RSD=1.35%，表明本品在48h内稳定。

2.7加样回收率试验精密称取已知含量为0.7854mg/g九味肝泰胶囊6份，精密添加不同量的黄芩苷对照品，置100ml量瓶中，加50%甲醇约80ml，超声处理20min，取出，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，按上述色谱条件测定，结果见表1。结果表明本法回收率好，方法可行。

2.8样品测定

分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液，按上述色谱条件测定，计算本品黄芩苷的含量，结果列于表2。

3讨论

实验以50%甲醇作为提取溶媒，对不同超声波处理时间进行了对比，实验结果表明超声处理20min已提取完全，故本文选择超声处理20min作为供试品溶液的提取方法。对不同系统的流动相进行了比较，结果样品中的黄芩苷在甲醇-水-冰醋酸(50：50：1)中分离效果好，峰形较佳，故采用甲醇-水-冰醋酸(50：50：1)为流动相。